藥廠中無菌隔離器驗證其實比較麻煩

很多藥廠的無菌隔離器驗證不規范，那么如何規范驗證呢？

無菌隔離器內部通過汽化過氧化氫滅菌器能夠反復進行滅菌，內壁可用滅菌劑處理，以去除所有的生物負載，滅菌完成后，無菌隔離器通過GX空氣過濾器(HEPA)或更高級別的空氣過濾器向其內部輸送潔凈空氣來維持內部的無菌環境。

　　無菌隔離器的使用從根本上避免了操作人員與實驗用物品的直接接觸，操作人員無需穿著專用潔凈服，而是通過無菌隔離器上的操作手套或半身操作服對艙內物品、儀器進行操作。手套-袖套組件或半身操作服是無菌隔離器艙體不可分割的一部分，它們由柔軟的材料制成且與所采用的滅菌劑兼容。

　　因此，無菌隔離器進行無菌檢驗，可以避免實驗用物品和輔助設備被污染，提高了無菌試驗結果的準確性。

很多藥廠的無菌隔離器驗證不規范，那么如何規范驗證呢？

無菌隔離器驗證方法

　　1、艙體密閉性確認

　　通過無菌隔離器全靜態封閉狀態下的壓力維持能力來判斷無菌隔離器的密閉性能是否達到要求。

　　①關閉無菌隔離器房間的門窗，排除對溫度影響較大的其它設備影響，盡量減少人員出入。

　　②關閉無菌隔離器艙體大門、傳遞門及所有檢測口，開啟無菌隔離器，進入壓力運行界面，點擊“開壓力測試"后艙體開始自動充氣壓力升至60Pa以上。

　　③當顯示壓力緩緩降至60Pa時，自動開始計時，壓力下降至42Pa時自動停止計時，點擊“壓力測試結果打印"，打印測試結果(另傳遞艙密閉性測試等同)。

　　④計算小時體積泄漏率Q/V=60(Ps—Pt)/(Pt×t)

　　式中：Q/V：小時體積泄漏率;Ps：起始壓力Pt：結束壓力;t：壓力下降均值，min。

　　判定標準：1小時泄漏率Q/V≤0.5%。如果三次測試艙體，泄漏率均小于0.5%，說明該無菌隔離器密閉性能良好，可防止外界微生物的進入。

　　2、系統的GX完整性檢測

　　通過檢測無菌隔離器的GX過濾器泄漏量，發現GX過濾器及其安裝過程中存在的缺陷，以便采取補救措施。檢測方法采用PAO法，通過測試GX過濾器上下游氣溶膠濃度比值得出GX過濾器泄漏率。

　?、僭诖郎y定的GX過濾器的上游端發生PAO氣溶膠作為塵源，待氣溶膠混合均勻后測試PAO濃度，把該濃度設定為1**%基準值，然后在GX過濾器下游端逐點掃描，檢測氣溶膠濃度，此時光度計顯示濃度與上游濃度的比值就是泄漏率。

　?、谏嫌味藲馊苣z濃度達到20～80ug/L。

　?、蹤z漏時采樣頭距離GX過濾器2-3cm，掃描速度在3-5cm/s。

　　判定標準：檢測點透過率高于0.01%即為漏點，整個過濾器平面透過率均小于0.01%即為合格。

　　3、過氧化氫氣體濃度及分布狀態確認

　　通過對無菌隔離器的VHPS濃度及分布的狀態進行驗證測試，以確認其是否滿足艙內滅菌的儀器。檢測方法如下：

　　①開啟設備自動運行程序。

　　②在滅菌階段開始時，記錄艙內初始過氧化氫濃度和相對濕度讀數，然后間隔2min記錄一次過氧化氫濃度和相對濕度讀數，直至滅菌階段結束。

　?、蹖⑦^氧化氫蒸汽化學指示劑分布于各測試點，在過氧化氫滅菌過程中觀察其變色情況，并對各點衍射進行比對。

　　判定標準：

　?、賄HPS滅菌系統在正常運行情況下，滅菌初始調節后艙內氣態過氧化氫濃度應不低于125ppm。

　?、诜植加谂搩雀鳒y試點過氧化氫蒸汽指示劑均能顯著變色，各指示條變色后顏色基本一致，無肉眼可見的顯著性差異。

　　4、過氧化氫滅菌效果確認

　　通過滅菌過程中對無菌隔離器內部氣化過氧化氫滅菌的滅菌效力進行確認，確保其達到預期的滅菌效果。

　　①在無菌隔離器艙內各特定點放置嗜熱脂肪芽孢菌。

　?、谠O定無菌隔離器運行參數，將運行參數記錄于表格中。

　?、蹎訜o菌隔離器自動運行程序，待無菌隔離器通風程序結束后，迅速將BI取下，并在無菌條件下接種至TSB培養基中。

　?、茉跓o菌條件下，將一片未直接接觸VHPS的BI接種至TSB培養基中，作為陽性對照管，另一只含TSB培養基的試管作為陰性對照管。

　　⑤將所有試驗培養基試管置于55-60℃恒溫培養箱培養7天，觀察培養基是否渾濁。

　　判定標準：

　?、偻卧囼炛?，試驗組中接種BI的TSB培養基均為長菌(為渾濁)，陽性對照有菌生長(渾濁)，陰性對照無菌生長，判定滅菌合格。

　?、谠囼灲M中TSB培養基有菌生長，陽性對照組有菌生長，判定為滅菌不合格。

　?、坳栃詫φ战M無菌生長或陰性對照組有菌生長，試驗組結果不管如何，均判定本次試驗無效。

　　通過對無菌隔離器的驗證，可以證明無菌隔離器是否可用于無菌檢驗，避免了實驗用品和輔助設備的污染，且日常采取了正確的啟用程序，能夠保證良好的無菌檢驗效果。通過驗證，可以降低日常維護成本，有利于無菌隔離器的正常運行。

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